（内容摘由项瑜，吴星, 江敏莹，韩华丽，吴锦辉）银屑病是一种由多基因遗传决定的、多因素刺激的免疫异常性慢性增生性皮肤病,目前全球银屑病患者逐渐增多。西医治疗银屑病的毒副作用大，目前还没有彻底根除治疗的药物，中医治疗有简、便、易行、不良反应少的优点。通过RT-qPCR技术筛选出外周血浆中差异表达的miRNA,为后期差异表达miRNA生物信息学分析提供进一步的线索,也为银屑病早期诊治提供思。同时观察柚皮王止痒润肤沐浴露治疗寻常型银屑病患者前后血浆差异表达miRNA及血清细胞因子的表达变化，探索中医中药治疗寻常型银屑病的作用机制,为中医中药防治银屑病提供客观依据。同时了解柚皮王止痒润肤沐浴露，是否有提高疗效、缩短起效时间、减少复发次数、延缓首次复发间隔时间、减少副作用、缓解瘙痒症状及提高银屑病患者生活质量的协同作用。

　　银屑病(Psoriasis Vulgaris, PV)，以皮肤红斑、丘疹或斑片上盖有银白色麟屑，不同程度的瘙痒为主要表现，是一种由多基因遗传决定的、多因素刺激的免疫异常性慢性增生性皮肤病,发病率占世界人口的 0.1％～3％，目前全球已有银屑病患者 1.25 亿。

　　我国总患病率为 0.72%，目前已有 1000 万患者。银屑病病因与发病机制非常复杂，目前尚无完全根治的手段，遗传流行病学和遗传学研究均，该疾病是一种多因子遗传模式的复杂疾病，涉及多个基因间的相互作用及基因与的交互作用

　　。miRNA 自身表达具有高度保守性、时序性和组织性，它通过基因切割和翻译的方式调节一些信号，并对人类至少 1/3 的基因表达发挥非常重要的调节作用

　　。miRNA 的表达异常能导致人类疾病的发生，也代表着潜在治疗和诊断用药的重要紀位。近年来，随着国内外学术界在小 RNA 领域研宄的逐步深入，发现多种 miRNA 在皮肤生理病理等过程中发挥了极其重要的作用，如皮肤肿瘤、银屑病、特应性皮炎等

　　。大量研究表明，差异表达的 microRNAs 在疾病中发挥着重要的作用，我们可以通过对 microRNA 的研究深入了解疾病的发病机制

　　。miRNAs 在同一个通中往往有几个不同基因 IE 点，以 miRNAs 为 IE 点的药物可能比单个蛋白质为 IE 点的药物更加有研究意义。从基因层面探讨银屑病的早期诊断、治疗及预防等课题势必会成为业界今后研宄的主要方向之一，为本研究打下了一定的基础。 银屑病严重影响着患者的工作、生活以及社交、情绪、性生活等多个方面，很大程度上降低了患者的生活质量。近年来，结合银屑病复杂的发病机理，对银屑病的中西医结合治疗策略已逐步从单纯的皮损治疗转向关注患者的心理健康、提高生活质量、延缓复发及减少并发症等方面，给患者带来

　　。柚皮王止痒润肤沐浴露采用专利特殊提取方法提取柚子皮中的柚皮素、柚皮苷、柚子黄酮及维生素等有效成分，具有较好的抗菌、抗炎、清除基、抗氧化及止痒等作用，前期试验证明在一定程度上，长期使用柚皮王止痒润肤沐浴露可以提高银屑病患者的生活质量。

　　所有病例均来源于申报单位附属门诊部寻常型银屑病病人，样本量估算 50 例。年龄在18-65岁7＜PASI评分≤20分，且体表面积（BSA）＜30％，平均病情为1~2年。排除妊娠或哺乳期妇女；已知对本研究中所用药物过敏、及含有相关药物成分（钙泊三醇、倍他米松）过敏的患者；正在参加其它药物临床试验者或1个月内参加过其它临床试验者；2周内曾用激素、维甲酸类等外用药物或紫外光治疗者；4周内曾接受系疗者；12周内曾使用生物制剂治疗者等除外。

　　采用随机对照试验设计，随机分为两组，试验组给予柚皮王止痒润肤沐浴露外洗，叠加西药局部用药（国际用于中重度患者的钙泊三醇倍他米松软膏），对照组给予单纯西药局部用药。

　　主要结局指标（治疗和随访期间银屑病的复发率、银屑病皮损面积与严重程度指数（PASI 评分），客观指标：miRNA(miR-146a、miR-155、miR-2 0、miR-142-3p、miR-181a)，次要结局指标（首次复发间隔时间、起效时间、患者自评瘙痒评分（VAS）、皮肤病生活质量指数（DLQI）。

　　cDNA 合成,按试剂盒(superscript II reverse transcriptase,Invitr-

　　ogen 公司)说明，采用 Oligo(dT) 逆。荧光定量PGR 反应，参考相应文献我们选取了5个 miRNA(miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a) 进行检测,以 cDNA 为模板,U6snRNA 为内参照，Cel-miR-39 为阳性对照,H

　　O为阴性对照,检测各样本中的miRNA 的相对表达水平。PCR检测记录每个反应管中每次循环所产生的荧光信号，当荧光强度达到一定阈值时，PCR仪记录此时循环数，以此为基础得到每个样本的Ct值，采用相对定量法来分析，以U6作为内参照，标

　　2.2治疗组的PASI 有效率明显高于对照组(P0.05)，治疗组没有出现加重的病例.

　　银屑病面积和严重程度指数（PASI）两组降低（P＜0.05），但治疗组降低更显著（P＜0.01）（表3）。

　　Table 3 Comparison on Scores of PASI of the Two Groups

　　治疗结束后，试验组与对照组寻常型银屑病患者血浆中5个差异性miRNAs进行RT QPCR检测，并分别与组内治疗前做出对比，结果差异均有显著性意义(p0.05 ) 。其中miRNA-146a, microRNA-210,miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调，差异有显著性意义(p0.05 )；miRNA-142-3p与治疗前比较，表达上调，差异有显著性意义(p0.05)。

　　试验组与对照组的外周血浆中miRNA(miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a）水平治疗前后的差值比较差异均无统计学意义（

　　0.05），提示试验组与对照组比较治疗前后的外周血清中各miRNA水平变化无显著性变化。

　　对患者外周血浆中5个差异性miRNA的表达水平与患者PASI积分作直线相关分析。患者外周血浆中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-210表达水平均与银屑病PASI呈正相关。患者外周血浆中miRNA-181a ,miRNA- I42-3p表达水平与银屑病PASI呈负相关。

　　2.6治疗后两组的DLQI和VAS评分均有下降，但两组间SDS和SAS评分没有显著性差异. (P 0.05).

　　治疗后，皮肤病学生活质量指数(DLQI)和视觉模拟量表(服从正态分布)在两组(P小于0.05)中均有所下降。但是两组之间的DLQI没有显著的差异(表5，6)。

　　Table 5. Comparison on Scores of DLQI of Two Groups before and after Treatment

　　Table 6. Comparison on Scores of VAS of Two Groups before and after Treatment

　　0.05, compared with pre-treatment in the treatment group  治疗组比对照组治疗明显,治疗组在 PDV比对照组好rna反映不明显，没有达到影响RNA。

　　在治疗后，两组在评定抑郁量表(SDS)、评定焦虑量表(SAS)(P-0.05)之间没有显著差异。

　　在常规的血液学、尿检、肝脏和肾脏功能以及心电图上都没有发现异常。两组中没有观察到不良反应。在这两组中没有出现同型反应的情况。

　　3.1 柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药比单纯西药局部用药治疗寻常型银屑病疗效明显;

　　柚皮王止痒润肤沐浴露采用专利特殊提取方法提取柚子皮中的柚皮素、柚皮苷、柚子黄酮及维生素等有效成分，具有较好的抗菌、抗炎、清除基、抗氧化及止痒等作用，长期使用对过敏及瘙痒性皮肤病有一定的辅助治疗效果。前期试验证明长期使用柚皮王止痒润肤沐浴露，可以缓解皮肤瘙痒及干燥等症状，在一定程度上可以提高银屑病患者的生活质量。

　　随着医学模式逐渐向“生理-心理-社会”模式，社会心理因素与疾病关系密切，对银屑病的中西医结合治疗策略和方向已逐步从单纯的皮损治疗转向提高患者的生活质量、延缓复发及减少并发症等方面。中西医结合治疗、生理、心理、社会综合治疗成为中西医结合治疗银屑病的方向。中、西医治疗银屑病，各有其优势和劣势，中西医结合治疗银屑病是目前新的治疗方向。

　　本研究结果表明，柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药治疗寻常型银屑病PASI评分改善程度（%）达52%，临床疗效比单纯西药局部用药治疗寻常型银屑病疗效明显优于对照组。此外，柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药治疗寻常型银屑病可以有效改善患者的皮肤病学生活质量指数(DLQI)和视觉模拟量表(VAS)，能有效改善患者的生活质量。SDS, SAS 分数没有显著提高。同时，或许由于治疗持续时间不够长，不足以证明患者心理上的变化。

　　3.2 柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药对寻常型银屑病患者外周血miRNA 的影响

　　柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药治疗银屑病对5个性miRNA ( miR-146a、miR-155、miR-210、miR-142-3p、miR-181a)有显著性调控作用。其中miRNA-146a, microRNA-210,miRNA-155，miRNA-181a与治疗前比较表达下调，miRNA-142-3p与治疗前比较表达上调。

　　我们对患者血浆中差异表达5个microRNA的表达水平与PASI积分作直线相关分析，结果显示miRNA-146a, miRNA-210的表达水平与PASI呈正相关，而miRNA-142-3p呈负相关。本次研究为下一步开展miRNA靶基因功能及标志物研究提供了实验基础。通过这次研究，我们便思考，是否柚皮王止痒润肤沐浴露外洗叠加西药局部用药能调控某些miRNAs，进而影响某些、蛋白的表达，从而影响着炎性因子的变化拟或是通过调节细胞因子水平来差异表达的miRNAs变化，或者两者兼而有之，有待我们今后进一步深入研究。

　　关于寻常型银屑病血浆microRNA谱的研究是一个复杂的网络，由于时间和经费的，我们试验没有对差异表达的miRNAs与其靶基因及基因调控功能展开深入研究。本次研究为后续进行miRNA靶基因的预测及更深层次的microRNA功能研究提供了实验基础。随着对差异表达的microRNA功能研究，我们将进一步探讨与银屑病相关的miRNA基因缺失或突变，以期寻找特定的靶基因，全面了解miRNA在细胞中的功能机制。然而，由于目前研究的小样本容量小，因此需要进一步的确认，以更大的样本量和较长的治疗时间。有用的基因表达的研究，因为时间经费有限，实验有，下一步将进行大样本 长时间的治疗，以后进行完善。

　　项瑜，医学博士研究生，毕业于广州中医药大学，博士专业中医外科学，硕士专业中医学七年制（针灸方向，国际交流型）。导师为卢传坚教授（广东省中医院副院长、全国首批名老中医专家学术经验继承人、广东省“千百十”工程学术培养对象、博士生导师）。针灸方面师从著名岭南针灸学家靳瑞教授，张全明教授（中医针灸专业博士，郑氏传统针法、靳三针学术传人、郑氏针法研究会常务理事、世界手合会副），彭旭明教授（针灸推拿专业博士，师从靳瑞教授、张家维教授，曾应邀赴巴西、智利、葡萄牙等多国，受到国际友人的热烈欢迎）。擅长中医针灸治疗常见皮肤病（痤疮、荨麻疹、湿疹、银屑病、带状疱疹、斑秃、白癜风等）及妇科疾病（月经不调、痛经、闭经、崩漏、妇科炎症、乳腺增生、多囊卵巢综合征、盆腔炎等）、失眠、高血压等，擅长中医减肥、美容调养及小儿推拿等。

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